紫外可見(jiàn)分光光度計是一種常用的實(shí)驗室儀器,廣泛應用于化學(xué)、生物、醫學(xué)和環(huán)境等領(lǐng)域。本文將介紹紫外可見(jiàn)分光光度計的基本原理、構造和使用方法。
一、基本原理
利用樣品吸收光的特性來(lái)測量其濃度的儀器。在紫外可見(jiàn)區域,不同物質(zhì)對光的吸收程度不同。當樣品通過(guò)光度計時(shí),會(huì )通過(guò)一個(gè)具有單色性能的光源發(fā)出的一束光線(xiàn)照射到樣品上,樣品會(huì )吸收部分光線(xiàn),使其透過(guò)樣品的光線(xiàn)減少。這部分被吸收的光線(xiàn)量可以通過(guò)檢測樣品前后光線(xiàn)強度的變化來(lái)計算出來(lái)。由此可以推算出樣品中某一特定物質(zhì)的濃度。
二、構造
通常由以下三個(gè)部分組成:光源、單色器和檢測器。
1.光源:該光度計中通常采用氘燈或鎢燈作為光源。
2.單色器:?jiǎn)紊髦饕脕?lái)將光源發(fā)出的白光分離成一束具有單色性能的光線(xiàn)。單色器中通常采用光柵或棱鏡作為分離機構,通過(guò)旋轉單色器上的光柵或棱鏡,可以選擇一個(gè)特定的波長(cháng)范圍。
3.檢測器:檢測器用于測量樣品前后光線(xiàn)強度的變化。常用的檢測器包括光電二極管和光電倍增管等。這些檢測器可以將光線(xiàn)轉化為電信號,并將其發(fā)送到計算機或數顯儀器上進(jìn)行顯示和記錄。
三、使用紫外可見(jiàn)分光光度計需要注意以下幾個(gè)方面:
1.樣品的制備:樣品需要被制備成透明均勻的溶液或懸浮液。如果樣品是固體,則需要先將其溶解或懸浮于適當的溶劑中。
2.手動(dòng)調節儀器:在進(jìn)行實(shí)驗之前,需要手動(dòng)調節光源和單色器以選擇適當的波長(cháng)范圍,并校正零點(diǎn)(即在沒(méi)有樣品的情況下測量背景光強度)。
3.放入樣品:將制備好的樣品倒入光路中,并根據需要選擇適當的路徑長(cháng)度。
4.記錄結果:記錄樣品前后的光線(xiàn)強度差值,并使用標準曲線(xiàn)或計算公式來(lái)計算樣品中某一特定物質(zhì)的濃度。