雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計主要用于測量樣品溶液的吸光度或透射率。它的工作原理基于比爾-朗伯定律,即溶液的吸光度與溶液中溶質(zhì)的濃度成正比,其特點(diǎn)是具有兩個(gè)獨立的光路,一個(gè)用于參考光束,另一個(gè)用于樣品光束。這種設計可以有效地消除光源強度波動(dòng)、探測器響應變化等因素的影響,提高測量的準確性和穩定性。
主要組成部分包括光源、單色器、樣品室、探測器和顯示器。光源通常采用氘燈(紫外區)和鎢燈(可見(jiàn)區),可以提供連續的光譜。單色器用于從光源發(fā)出的寬帶光譜中選擇特定波長(cháng)的光,通常采用光柵或棱鏡作為分散元件。樣品室用于放置待測樣品,通常采用石英或玻璃制成,以保證在紫外和可見(jiàn)區域的透光性。探測器用于檢測通過(guò)樣品后的光強,常用的有光電二極管、光電倍增管等。顯示器用于顯示測量結果,可以是數字顯示屏或計算機屏幕。
雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計的工作原理如下:
1.光源發(fā)出的寬帶光譜經(jīng)過(guò)單色器后,選擇出特定波長(cháng)的光。這個(gè)特定波長(cháng)的光被分為兩束,一束作為參考光束,另一束作為樣品光束。
2.參考光束直接照射到探測器上,探測器將光強信號轉換為電信號,并傳輸給顯示器。顯示器記錄下參考光束的光強值,作為后續計算的基準。
3.樣品光束照射到樣品室中的樣品溶液上,部分光被樣品吸收,部分光透過(guò)樣品。透過(guò)樣品的光照射到探測器上,探測器將光強信號轉換為電信號,并傳輸給顯示器。顯示器記錄下樣品光束的光強值。
4.顯示器根據比爾-朗伯定律,計算出樣品溶液的吸光度或透射率。具體計算公式為:吸光度A=log(I0/I),其中I0為參考光束的光強值,I為樣品光束的光強值。透射率T=(I/I0)×100%,表示樣品對光的透過(guò)程度。
5.通過(guò)改變單色器的設置,可以選擇不同的波長(cháng)進(jìn)行測量,從而得到樣品溶液在不同波長(cháng)下的吸光度或透射率曲線(xiàn)。這些曲線(xiàn)可以用于分析樣品的成分、濃度等信息。