數顯可見(jiàn)分光光度計是一種常用的光譜分析儀器。其主要原理是在選擇性吸收現象基礎上測量物質(zhì)的濃度，該原理也被稱(chēng)為比色法。經(jīng)過(guò)樣品的光線(xiàn)受到吸收后，產(chǎn)生一個(gè)比原來(lái)較弱的帶有物質(zhì)色彩特征的光譜?？梢?jiàn)光區域的波長(cháng)范圍通常是400-800nm，因此數顯可見(jiàn)分光光度計使用濾波片選擇準確的波長(cháng)范圍，將寬譜默認為單一波長(cháng)，即所選范圍內的某個(gè)波長(cháng)進(jìn)行測量。適用于化學(xué)、生物、食品、醫藥等領(lǐng)域。其主要用途包括測定水溶液中某種離子、有機化合物、蛋白質(zhì)、肽類(lèi)以及酶的活性等。
樣品中物質(zhì)吸收的程度與其濃度成正比，數顯可見(jiàn)分光光度計通過(guò)對透射光和進(jìn)入樣品前的光強進(jìn)行比較，測定了樣品中物質(zhì)的吸光度。高濃度樣品的吸光度較大，而低濃度樣品的吸光度則較小。主要由光源、狹縫、棱鏡(或光柵)、濾波片、檢測器和顯示器組成。光源產(chǎn)生可見(jiàn)光，并將其發(fā)射至狹縫處。狹縫起到減少入射的光束寬度的作用，使它們成為平行的光線(xiàn)。由棱鏡(或光柵)引導的光束，被分散成多條波長(cháng)不同的光譜，形成一個(gè)彩色圖像，接著(zhù)選擇合適的濾波片進(jìn)行過(guò)濾，只留下與該物質(zhì)吸收峰匹配的波長(cháng)。光線(xiàn)經(jīng)過(guò)樣品(通常放置在立方體玻璃池中)，吸收一部分后穿過(guò)檢測器，檢測器轉換為電信號。電信號被顯示器解釋和表示，并通過(guò)計算濃度值來(lái)確定樣品中要測定物質(zhì)的含量。
使用數顯可見(jiàn)分光光度計測量樣品的方法主要包括以下幾個(gè)步驟：
1.打開(kāi)儀器電源，按下預熱鍵。一般情況下，預熱時(shí)間為15-30分鐘，預熱完成后屏幕上會(huì )顯示出“OK”提示。
2.將試管架空載入儀器中，關(guān)閉光源調節旋鈕并將光程旋鈕調成大值。此時(shí)零位指示燈亮起，表示已進(jìn)入調零狀態(tài)。然后打開(kāi)光源調節旋鈕，逐漸調節到合適的光強度大小，并按下ZERO鍵復位。
3.將待測樣品放入比色皿中，并放入試管架中，打開(kāi)光源和檢波室開(kāi)關(guān)。根據需要選擇吸光度或所需檢測波長(cháng)，并轉動(dòng)光程旋鈕以使測量結果好。
4.當示波器振蕩穩定后，記錄示值即為該樣品的吸光度。如需多次測量同一樣品，請重新進(jìn)行校零操作后再進(jìn)行。
5.使用完畢后應及時(shí)清洗相關(guān)部件，避免交叉污染和對儀器造成損害。
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