超微量分光光度計原理是我們從事實(shí)驗室儀器研究和應用的人員需要掌握的知識。分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。該儀器是實(shí)驗室、科研機構、醫療、農業(yè)、食品廠(chǎng)、飲用水廠(chǎng)等機構*檢驗設備。已經(jīng)成為現代分子生物實(shí)驗室常規儀器。數字分光光度計常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長(cháng)濃度的定量。分光光度計基本原理是指采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(cháng)的光源，通過(guò)系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長(cháng)的光源，光源透過(guò)測試的樣品后，部分光源被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。單色光輻射穿過(guò)被測物質(zhì)溶液時(shí)，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長(cháng)度）成正比。
超微量分光光度計，就是根據物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結構和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見(jiàn)光區任意選擇不同波長(cháng)的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(cháng)的光能量，相應地發(fā)生了分子振動(dòng)能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會(huì )相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn)，可根據吸收光譜上的某些特征波長(cháng)處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
1、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素：他們可以引起機械部件的銹蝕，使金屬鏡面的光潔度下降，引起儀器機械部分的誤差或性能下降；造成光學(xué)部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕，產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等，甚至儀器停止工作，從而影響儀器壽命。維護保養時(shí)應定期加以校正。使用紫外分光光度計應具備四季恒濕的儀器室，配置恒溫設備，特別是地處南方地區的實(shí)驗室。
2、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機械系統的靈活性、降低各種限位開(kāi)關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一：因此，使用紫外分光光度計必須定期清潔，保障環(huán)境和儀器室內衛生條件，防塵。
3、比例雙光束紫外分光光度計使用一定周期后，內部會(huì )積累一定量的塵埃，由維修工程師或在工程師指導下定期開(kāi)啟儀器外罩對內部進(jìn)行除塵工作：同時(shí)，將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固，對光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔，必要時(shí)對光路進(jìn)行校準，對機械部分進(jìn)行清潔和必要的潤滑。zui后，恢復原狀，再進(jìn)行一些必要的檢測、調校與記錄。分析儀器工作者要懂得儀器的日常維護和對主要技術(shù)指標的簡(jiǎn)易測試方法，自己經(jīng)常對儀器進(jìn)行維護和測試，以保證儀器工作在*狀態(tài)。
超微量分光光度計是精密儀器，正確安裝、使用及保養對保持儀器良好的性能和保證測試的準確度具有重要作用。為了保證測試結果的準確性及可靠性，新制造、使用中和修理后的分光光度計都應定期進(jìn)行檢定。檢定不合格的儀器還要進(jìn)行及時(shí)調整。除此之外，分光光度計的操作步驟都有啥？為了解決使用者的疑惑，更好的保護分光光度計與實(shí)驗結果的準確性，本次特別介紹分光光度計，供參考！
超微量分光光度計的檢驗小妙招
1.波長(cháng)準確度的檢驗：
分光光度計在使用過(guò)程中，由于機械振動(dòng)、溫度變化、燈絲變形、燈座松動(dòng)或更換燈泡等原因，經(jīng)常會(huì )出現刻度盤(pán)上的讀數與實(shí)際通過(guò)溶液的波長(cháng)不符合的現象，
因而導致儀器靈明度降低，影響測定結果的精度，需要進(jìn)行檢驗。
檢驗波長(cháng)準確度zui簡(jiǎn)單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量?jì)x器的吸收峰值， 如果測出的值與濾光片標準值之差超出規程規定， 則需要進(jìn)行波長(cháng)調節。
2.透射比正確度的檢驗：
用透射比標準值分別為10 %、20 %、30 %左右的光譜中性濾光片，可見(jiàn)光區分別在440、546、635nm波長(cháng)處，以空氣為參比，分別測量各濾光片的透射比，紫外光區用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長(cháng)處，以高氯酸溶液為參比，測量其透射比。
3.穩定度的檢驗：
在零點(diǎn)不受光的條件下，用零點(diǎn)調節器將儀器調至零點(diǎn)，觀(guān)察3分鐘讀取透射比的變化，即為零點(diǎn)穩定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處，調節零點(diǎn)后，蓋上樣品室蓋（打開(kāi)光門(mén)），使光電管受光，調節透射比為95%（數顯儀器調至）察3分鐘讀取透射比的變化，為光電流穩定性。
4.光的檢驗：
雙光束分光光度計棱鏡式儀器在420nm處，光柵式儀器在360nm處，紫外分光計在220nm處分別用符合規定的截止濾光片，以空氣為參比，測量其透射比值，即為儀器在相應波長(cháng)下的雜散輻射率。
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