紫外分光光度計根據物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結構和物質(zhì)間相互作用的有效手段??梢栽谧贤饪梢?jiàn)光區任意選擇不同波長(cháng)的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(cháng)的光能量,相應地發(fā)生了分子振動(dòng)能級躍遷和電子能級躍遷的結果。
由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會(huì )相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn),可根據吸收光譜上的某些特征波長(cháng)處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
紫外分光光度計的應用:
檢定物質(zhì)
根據吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是吸收波長(cháng)λmax和摩爾吸收系數ε,是檢定物質(zhì)的常用物理參數。
與標準物及標準圖譜對照
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見(jiàn)吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應*一致。如果沒(méi)有標樣,也可以和現成的標準譜圖對照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準確,精密度高,且測定條件要相同。
比較大吸收波長(cháng)吸收系數的一致性
由于紫外吸收光譜只含有2~3個(gè)較寬的吸收帶,而紫外光譜主要是分子內的發(fā)色團在紫外區產(chǎn)生的吸收,與分子和其它部分關(guān)系不大。具有相同發(fā)色團的不同分子結構,在較大分子中不影響發(fā)色團的紫外吸收光譜,不同的分子結構有可能有相同的紫外吸收光譜,但它們的吸收系數是有差別的。如果分析樣品和標準樣品的吸收波長(cháng)相同,吸收系數也相同,則可認為分析樣品與標準樣品為同一物質(zhì)。
反應動(dòng)力學(xué)研究
借助于分光光度法可以得出一些化學(xué)反應速度常數,并從兩個(gè)或兩個(gè)以上溫度條件下得到的速度數據,得出反應活化能。
純度檢驗
紫外吸收光譜能測定化合物中含有微量的具有紫外吸收的雜質(zhì)。如果化合物的紫外可見(jiàn)光區沒(méi)有明顯的吸收峰,而它的雜質(zhì)在紫外區內有較強的吸收峰,就可以檢測出化合物中的雜質(zhì)。
氫鍵強度的測定
不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同,這可以利用紫外光譜來(lái)判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度,以確定選擇哪一種溶劑。
絡(luò )合物組成及穩定常數的測定
金屬離子常與有機物形成絡(luò )合物,多數絡(luò )合物在紫外可見(jiàn)區是有吸收的,可以利用分光光度法來(lái)研究其組成。