實(shí)驗室分光光度計是物質(zhì)中的分子和原子在入射光中吸收特定波長(cháng)的光能,從而發(fā)生分子振動(dòng)能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種材料不同的分子、原子和不同的分子空間結構,光能量的吸收,它不會(huì )是相同的結果,每個(gè)材料都有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn),根據一些特征吸收光譜波長(cháng)的吸光度的歧視或確定材料的內容,這是定性和定量的光度分析的基礎。分光光度分析是根據物質(zhì)的吸收光譜研究其組成、結構和相互作用的有效手段。
實(shí)驗室分光光度計的定量分析是基于朗伯-比爾定律。即物質(zhì)在一定濃度下的吸光度與吸收介質(zhì)的厚度成正比,其數學(xué)表達式如下:
Uv紫外可見(jiàn)分光光度計的復合光源鎢燈,通過(guò)步進(jìn)電機驅動(dòng)控制氘燈鏡M 1,反映出入射狹縫,手牽手在單色儀,光柵衍射的單色光通過(guò)聚焦,準直鏡M2融合通過(guò)出口狹縫,梁達到砍伐裝置時(shí),在一段時(shí)間內的光成為參考光路,另一段時(shí)間光傳輸成為樣本路徑。兩束光交替照亮檢測器(光電倍增管)。
實(shí)驗室分光光度計測試完成
取下托盤(pán),擦拭樣品室,加入干燥劑,關(guān)閉樣品室蓋。關(guān)閉儀器電源,蓋上儀器防塵蓋。使用小杯后,立即用蒸餾水或有機溶液沖洗,并用柔軟干凈的紗布擦拭污漬。
實(shí)驗室分光光度計是用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量和定性分析的儀器。通過(guò)測量光在特定波長(cháng)或特定波長(cháng)范圍內的吸收,對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。常用的波長(cháng)范圍為:(1)紫外區200 ~ 400nm,(2)可見(jiàn)光區400 ~ 760nm,(3)紅外區2.5 ~ 25m (4000cm<-1> ~ 400cm<-1>)。所用儀器有紫外分光光度計、可見(jiàn)光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證計量的精密度和準確度,所有儀器應按照國家計量檢定規程或本附錄的規定進(jìn)行定期檢定和檢定。
實(shí)驗室分光光度計是利用分光光度法,通過(guò)測定被測物質(zhì)在某一特定波長(cháng)或某一波長(cháng)的光的吸收情況,對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。
實(shí)驗室分光光度計的基本原理是相似的。它們都使用一種可以產(chǎn)生多種波長(cháng)的光源,并通過(guò)一系列分光光度計產(chǎn)生特定波長(cháng)的光源。光源通過(guò)被測樣品后,部分光源被吸收。通過(guò)測量樣品的吸收值,經(jīng)計算可轉換為樣品的濃度。樣品的吸收值與樣品的濃度成正比。
分光光度計使用一種可以產(chǎn)生多種波長(cháng)的光源。通過(guò)一系列分光光度儀,產(chǎn)生了特定波長(cháng)的光源。光源通過(guò)被測樣品后,部分光源被吸收,計算出樣品的光吸收值,再將光吸收值轉化為樣品的濃度。樣品的吸收值與樣品的濃度成正比。
使用范圍
實(shí)驗室分光光度計任何具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結構的有機化合物都可以根據特定吸收波長(cháng)測定的吸光度進(jìn)行藥物的鑒別、純度檢測和含量測定。
實(shí)驗室分光光度計使用注意事項
?。?)空白溶液和測試產(chǎn)品溶液必須澄清,不得混濁。如遇渾濁,應提前過(guò)濾,將原濾液丟棄。
?。?)除另有規定外,測試產(chǎn)品溶液應以溶劑瓶為空白對照,使用1cm石英吸收池進(jìn)行測定。
?。?)測試在規定的吸收峰波長(cháng)2nm范圍內的幾個(gè)點(diǎn)的吸光度,檢查測試產(chǎn)品的吸收峰波長(cháng)位置是否正確。除另有規定外,吸收峰波長(cháng)應在本品種規定波長(cháng)2nm以?xún)?;否則,應考慮樣品的真實(shí)性、純度和儀器波長(cháng)的準確性,并以zui吸附量較大的波長(cháng)作為測量波長(cháng)。
?。?)一般測試溶液吸光度讀數,誤差較小,在0.3 ~ 0.7之間。
?。?)吸收池應選擇配對,否則會(huì )引入測量誤差。如果兩個(gè)吸收池在規定波長(cháng)下的透過(guò)率差小于0.5%,則兩個(gè)吸收池匹配。如有必要,兩個(gè)吸收池之間的誤差應從終的zui測量中扣除。
光電倍增管檢測到的信號通過(guò)前置放大器和驅動(dòng)卡傳輸到微機控制器。分光光度法是分析儀器中常用、有效的方法之一。幾乎每個(gè)分析實(shí)驗室都依賴(lài)于紫外可見(jiàn)分光光度計。分光光度法具有以下主要特點(diǎn)。
1. 高靈敏度
由于大量新的色素的合成和應用研究取得可喜進(jìn)展,先進(jìn)元素測定的敏感性,尤其是multi-complex和各種表面活性劑的應用研究,許多元素的摩爾吸光系數增加從幾萬(wàn)到幾十萬(wàn)。
是有選擇性的
目前,只要控制好顯色條件,就可以用分光光度法測定鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素。
3.精度高
對于普通分光光度法,其濃度測定的相對誤差在l ~ 3%范圍內。采用差示分光光度法測定,誤差可減小到0。X %。
4. 適用濃度范圍廣
實(shí)驗室分光光度計可以從常數(1%-50%)鍺用微分法測定(10.8-10.6%)(預濃縮后)。
5. 成本低,操作簡(jiǎn)單,運行速度快,應用范圍廣
該方法可用于紫外可見(jiàn)區吸收的各種無(wú)機和有機物的測定。到目前為止,除了少數放射性元素和惰性元素外,這種方法幾乎適用于周期表上的所有元素。光度法在上發(fā)表的分析論文中約占28%,在國內發(fā)表的分析論文中約占33%。