?、侪h(huán)境溫濕度 儀器應安放在干燥的房間內,使用溫度為5~35℃,相對濕度不超過(guò)85%,應控制在45%~65%,無(wú)冷凝。如有條件,應配備去濕機(空調)、濕度計等,在相對濕度較大的地區應在儀器周?chē)乓恍└稍飫?/div>
?、跓o(wú)強光干擾及磁場(chǎng)干擾 室內照明不宜太強,且避免直射日光的照射。儀器應盡量遠離高強度的磁場(chǎng)、電場(chǎng)及發(fā)生高頻波的電器設備,防電磁干擾。
2、取吸收池時(shí),手指應拿毛玻璃面的兩側,裝盛樣品以池體的4/5為度,使用揮發(fā)性溶液時(shí)應加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應無(wú)溶劑殘留。吸收池放入樣品室時(shí)應注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈,晾干防塵保存。
4、測定時(shí)除另有規定外,應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照,采用1cm石英吸收池,在規定的吸收峰±2nm以?xún)?,測幾個(gè)點(diǎn)的吸收度或由儀器在規定的波長(cháng)附近自動(dòng)掃描測定,以核對供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度zui大的波長(cháng)作為測定波長(cháng),除另有規定外吸收度zui大波長(cháng)應在該品種項下規定的測定波長(cháng)±2nm以?xún)取?/div>
5、選用儀器的狹縫寬度應小于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值會(huì )偏低,狹縫寬度的選擇應以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準,對于大部分被測品種,可以使用2nm縫寬。
超微量分光光度計為了測量不同方向上的光強,上海光度計將燈具安裝在分布光度計上,以便于將其定位在規定的角度。分布光度計通常由一個(gè)用以支撐和定位燈具或光源以及光度探頭的機械裝置,連同一些獲取和處理數據的輔助設備組成。
上海光度計基本上可以分為三種:
一種使燈具繞兩根相互垂直的軸旋轉,且兩根軸的交點(diǎn)是分布光度計光度中心的分布光度計這類(lèi)分布光度計通常使用一個(gè)單獨的且安裝在離光度中心距離足夠遠的光度計探頭。
一種分布光度計,燈具僅繞一根軸旋轉,燈具與光度探頭的相對運動(dòng),光度探頭在穿過(guò)分布光度計的光度中心面內相對于*根軸的角度并跨越*根軸,繞第二根軸作第二種旋轉。
一種燈具*不動(dòng)的分布光度計。光度探頭繞兩根穿過(guò)分布光度計光度中心且相互垂直的軸旋轉。
超微量分光光度計的使用方法
1.選擇測定波長(cháng)
2.接通電源開(kāi)關(guān),把黑體放在*格并置于光路中,合上樣品室暗箱蓋,模式處于T 狀態(tài)下預熱20分鐘;(斷開(kāi)光路)
3.將裝有參比溶液和被測樣品的比色皿依次置于樣品室中(參比置于第二個(gè)格)。
4.調0%T:將黑體置于光路中,T 應為0%,否則調“0%T”按鍵使顯示為000。
5.調T=100%:將參比溶液置于光路,T 應為,否則調節“100%T”按鍵,使指針指在T=100%。(注意:不測定溶液吸光度時(shí),應把黑體置于光路,防止光照長(cháng)時(shí)間照射檢測器)。
6. 樣品的測定:把模式設置為A ,將樣品液依次處于光路中,分別記下被測樣品的吸光度。
7.測量完畢,及時(shí)取出比色皿,用水洗干凈后倒置于濾紙上晾干,并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈,關(guān)掉電源,儀器恢復至初始狀態(tài)。
8.填寫(xiě)儀器使用記錄表
大屏幕紫外分光光度計由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會(huì )相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn),UV-3802準雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計可根據吸收光譜上的某些特征波長(cháng)處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(cháng)的光能量,相應地發(fā)生了分子振動(dòng)能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會(huì )相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn),可根據吸收光譜上的某些特征波長(cháng)處的吸光度的高低判別或 測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據物質(zhì)的吸 收光譜研究物質(zhì)的成分、結構和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
超微量分光光度計的使用經(jīng)驗
1、幾乎所有的光譜分析儀器都是依據的朗伯-比耳定律。
2、很多藥品要求相對誤差在1%以?xún)取?/div>
3、若石英比色皿QC的配對誤差為0.1%T,則給使用者帶來(lái)的分析誤差為0.5%。若QC的配對誤差為0.5%,則分析誤差為3%。
4、大屏幕紫外分光光度計分析測試時(shí),注進(jìn)比色皿的溶液不要太滿(mǎn),一般到比色皿高度的2/3即可。
5、一般的光電檢測器如硅光電池、光電管、光電倍增管有疲憊效應,應避免長(cháng)時(shí)間照射、預熱時(shí),打開(kāi)樣品室蓋,防止光電檢測器受光疲憊。
6、光譜帶寬以nm計,狹縫寬度以mm計。
7、波長(cháng)正確度在某種程度上,決定光度正確度。
8、噪聲限制紫外可見(jiàn)分光光度計對樣品分析濃度的下限,并直接影響儀器的信噪比。雜散光直接限制被分析測試樣品濃度的上限。
9、雜散光對參比光束和樣品光束的影響是相同的。
10、在要求較高的分析測試工作中,紫外可見(jiàn)分光光度計的雜散光應優(yōu)于0.05%,這樣可保證儀器有較寬的線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍。
11、雜散光通常在紫外區。實(shí)際測試時(shí),應檢測整個(gè)光譜區的兩個(gè)端點(diǎn)的雜散光。
12、紫外可見(jiàn)分光光度計的光度噪聲與掃描速度有很大關(guān)系。一般來(lái)講,掃描速度快的紫外可見(jiàn)分光光度計的噪聲也大。
13、大屏幕紫外分光光度計的基線(xiàn)平直度是指每個(gè)波長(cháng)上的光速噪聲。測基線(xiàn)平直度時(shí),掃描速度用慢速。
14、紫外可見(jiàn)分光光度計的線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍取決于儀器的雜散光與噪聲。
15、為了得到更好的光度正確度,在分析過(guò)程中,特別要留意選擇試樣的zui大吸收峰處的波長(cháng)作為測試波長(cháng)。
16、選擇光譜帶寬的原則是,在一定的實(shí)驗條件下,測試吸光度隨光譜帶寬的變換,以獲得zui大吸光度值的光譜帶寬作為欲選擇的光譜帶寬。
17、判定被測試樣是否有光解現象,首先要看測試數據的變化規律,對同一個(gè)試樣多次丈量,看其吸光度值是否都是向同一個(gè)方向變化,假如是,就可能有光解現象。