紫外可見(jiàn)光分光光度計主要項目對分析結果的影響:
1)波長(cháng)準確度
分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應于樣品吸收光譜中的某一個(gè)吸收峰的波長(cháng)。由于儀器的制造和調整誤差,單色光的實(shí)際波長(cháng)與儀器的波長(cháng)讀數值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,對波長(cháng)準確度要求允許寬些。但是,當吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側邊緣比較陡直,此時(shí)波長(cháng)準確度的影響就必須引起注意。
2)透射比(吸光度)準確度
很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測試結果的可信性越差,從而影響到測試數據的準確性。
3)雜散光
雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著(zhù)樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結果帶來(lái)一定的誤差。在紫外的短波區域光源強度和檢測器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項重要指標。
紫外可見(jiàn)光分光光度計使用與維護:
1)若大幅度改變測試波長(cháng),需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“”點(diǎn)。然后再測量。
2)指針式儀器在未接通電源時(shí),電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機械調零。
3)比色皿使用完畢后,請立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。
4)操作人員不應輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈,以免影響光效率。
5)分光光度計,由于其光電接收裝置為光電倍增管,紫外可見(jiàn)光分光光度計本身的特點(diǎn)是放大倍數大,因而可以用于檢測微弱光電信號,而不能用來(lái)檢測強光。否則容易產(chǎn)生信號漂移,靈敏度下降。針對其上述特點(diǎn),在維修、使用此類(lèi)儀器時(shí)應注意不讓光電倍增管長(cháng)時(shí)間暴露于光下,因此在預熱時(shí),應打開(kāi)比色皿蓋或使用擋光桿,避免長(cháng)時(shí)間照射使其性能漂移而導致工作不穩。
6)放大器靈敏度換擋后,必須重新調零。
7)比色杯的配套性問(wèn)題。比色杯必須配套使用,否則將使測試結果失去意義。在進(jìn)行每次測試前均應進(jìn)行比較。具體方法如下;分別向被測的兩只杯子里注入同樣的溶液,把紫外可見(jiàn)光分光光度計置于某一波長(cháng)處,石英比色杯;220nm、700nm裝蒸餾水,玻璃比色杯:700nm處裝蒸餾水,將某一個(gè)池的透射比值調至,測量其他各池的透射比值,記錄其示值之差及通光方向,如透射比之差在±0.5%的范圍內則可以配套使用,若超出此范圍應考慮其對測試結果的影響。