紫外可見(jiàn)光分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。該儀器是食品廠(chǎng)、飲用水廠(chǎng)辦理QS、HACCP認證的*檢驗設備。
分光光度法是通過(guò)測定被測物質(zhì)在特定波長(cháng)處或一定波長(cháng)范圍內光的吸收度,對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。常用的波長(cháng)范圍為:
(1)200~400nm的紫外光區。
(2)400~760nm的可見(jiàn)光區。
(3)2.5~25μm(按波數計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區。
所用儀器為紫外分光光度計、可見(jiàn)光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準確度,所有儀器應按照國家計量檢定規程或本附錄規定,定期進(jìn)行校正檢定。
儀器組成
紫外可見(jiàn)光分光光度計已經(jīng)成為現代分子生物實(shí)驗室常規儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長(cháng)濃度的定量。
儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統組成。
光譜范圍
紫外可見(jiàn)光分光光度計包括波長(cháng)范圍為400~760 nm的可見(jiàn)光區和波長(cháng)范圍為200~400 nm的紫外光區.不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源.
鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的400~760nm波長(cháng)的光譜光通過(guò)三棱鏡折射后,可得到由紅橙,黃綠,藍靛,紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見(jiàn)光分光光度計的光源.
氫燈(或氘燈)的發(fā)射光譜:氫燈能發(fā)出185~400 nm波長(cháng)的光譜可作為紫外光光度計的光源.
物質(zhì)的吸收光譜
如果在光源和棱鏡之間放上某種物質(zhì)的溶液,此時(shí)在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現了幾條暗線(xiàn),即光源發(fā)射光譜中某些波長(cháng)的光因溶液吸收而消失,這種被溶液吸收后的光譜稱(chēng)為該溶液的吸收光譜.
不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的.因此根據吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質(zhì)。